• 19-Nortestosterone in urine of slaughtered cattle illegally injected with anabolic preparations

      Jansen EHJM; van den Berg RH; Enkelaar-Willemsen C; van Blitterswijk H; Stekelenburg P; Both-Miedema R; Stephany RW (Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu RIVM, 1986-02-28)
      In deze studie is het urinaire 19-nortestosteron (NT) gehalte van met NT behandelde dieren vergeleken met de hoeveelheid resterend NT in de toedieningsplaats. Er zijn in totaal 136 dieren onderzocht, hoofdzakelijk kalveren, verdeeld over drie groepen. Geconcludeerd wordt dat er geen correlatie te vinden is tussen het urinaire NT-gehalte en de hoeveelheid NT restant in de toedieningsplaats. Tevens werd aangetoond dat indien de monsters urine van deze dieren in een keuringsprogramma onderzocht zouden zijn via een combinatie van hoge druk vloeistofchromatografie en radioimmunochemisch onderzoek (HPLC- RIA), er afhankelijk van de keuze van de beslissingsgrens voor voortgezet bevestigingsonderzoek een zeer groot aantal (70-90%) fout- negatieve resultaten zouden zijn verkregen.<br>
    • Excretion of alpha- and beta-trenbolone in urine of veal calves implanted with trenbolone acetate in combination with estradiol or zeranol

      Jansen EHJM; Zoontjes PW; van Blitterswijk H; Stephany RW (Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu RIVM, 1986-02-28)
      De uitscheiding van alfa- en beta-trenbolon in de urine van kalveren die behandeld zijn met trenbolonacetaat is bepaald via hoge druk vloeistofchromatografie met UV-detectie bij 350 nm. Uit deze proef blijkt dat de hoofdmetaboliet alfa-trenbolon is, terwijl beta-trenbolon nauwelijks uitgescheiden wordt. De gehalten aan alfa-trenbolon kunnen oplopen tot 30 ug/l en zijn bij een aantal dieren nog 48 dagen na behandeling aantoonbaar. De resultaten laten echter zien dat de urinaire gehalten van trenbolon en/of metabolieten aanzienlijk fluctueren. Als gevolg hiervan zijn deze gehalten minder geschikt om bij mestkalveren te controleren of de vereiste wachttijden na toepassing van Trenboloneacetaat houdende implantaten in acht zijn genomen in geval van (een mogelijk toekomstig) toegestaan legaal gebruik.<br>
    • Fast HPLC screening method for the presence of trenbolone and its major metabolite in urine of slaughter cattle

      Jansen EHJM; Zoontjes PW; van Blitterswijk H; Both-Miedema R; Stephany RW (Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu RIVM, 1984-11-30)
      Een eenvoudige en snelle detectiemethode voor 17beta-trenbolon en zijn hoofdmetaboliet 17alfa-trenbolon wordt beschreven. Hierbij wordt gebruik gemaakt van een HPLC-scheiding op een "normal phase" kolom met UV-detectie bij 350 nm. De absolute detectiegrens ligt in de orde van 0.3-0.4 ng, terwijl de detectielimiet in urinemonsters ligt in de orde van 1-2 mug/l.<br>
    • Radioimmunochemisch onderzoek naar de aanwezigheid van stilbeenderivaten in slachtdieren. IX. De bepaling van diethylstilbestrol in gal na zuivering via hoge druk vloeistofchromatografie

      Jansen EHJM; van Blitterswijk H; Stephany RW (Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu RIVM, 1984-07-17)
      Een radioimmunochemische bepalingsmethode (RIA) voor diethylstilbestrol (DES) in rundergal werd ontwikkeld door gebruikmaking van hoge druk vloeistofchromatografie (HPLC). De HPLC-zuiveringsstap werd geautomatiseerd. Met deze procedure kunnen 36 monsters binnen 24 uur gezuiverd worden. Indien gewenst kunnen ook dienestrol en hexestrol bepaald worden. Monsters gal en urine zijn geanalyseerd, afkomstig van een RIV/IVVO modelproef met 24 vleesstieren. De DES-gehalten in urine en gal blijken een goede correlatie op te leveren. De DES-gehalten in gal liggen gemiddel hoger dan die in urine (een factor 2 tot 5). Vooral bij de lage gehalten is dit verschil het grootst. Om deze redenen is gal evenals urine geschikt als onderzoeksmateriaal om illegaal gebruik van DES bij runderen aan te tonen.
    • Residuen van anabolica in toedieningsplaatsen bij slachtdieren. II Specifieke identificatie van anabolica met HPLC-diode array detectie

      van Blitterswijk H; Jansen EHJM; Stephany RW (Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu RIVM, 1985-09-16)
      De combinatie hoge druk vloeistofchromatografie (HPLC) met in situ totale ultraviolet (UV) spectrumdetectie via het "diode array principe", wordt nader beschreven en geevalueerd. Een relatief grote hoeveelheid stof (circa 200 nanogram) is benodigd voor spectrum identificatie. Voor piekdetetie bij een of meerdere discrete golflengten, ligt de gevoeligheid ongeveer een factor 100 lager. In bijlage I worden van 85 standaarden van o.a. anabolica, andere steroiden en sulfonamiden de UV-spectra gegeven onder HPLC condities. Bijlage II bevat een gedetailleerde beschrijving van de methode. Gezien de resultaten wordt voorgesteld de techniek nu voor identificatie van anabolica in toedieningsplaatsen een hierarchisch hogere status te geven dan tot nu toe het geval is geweest, namelijk slechts een screeningsmethode. Voorgesteld wordt als onderzoekprocedure: screening en identificatie via HPLC-diode array detectie, met zonodig voor (her)keuringsonderz. aanvullende identificatie via bijvoorbeeld HPLC- RIA, HPLC-DLC, HPLC-GC of HPLC-GC-LRMS.<br>
    • Residuen van anabolica in toedieningsplaatsen bij slachtdieren. III Overzicht en evaluatie van de periode oktober 1983 tot en met december 1984

      Jansen EHJM; van Blitterswijk H; Stephany RW (Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu RIVM, 1985-04-30)
      Gedurende 15 maanden werden 573 monsters toedieningsplaats onderzocht op de aanwezigheid van anabolica via de combinatie HPLC met diode array detectie. Met deze multi-methode werden in 462 monsters anabolica aangetroffen, waaronder het lichaamsvreemde androgene steroid nortestosteron veelvuldig voorkwam (84%). De esters van de lichaamseigen steroiden testosteron en estradiol werden ook veel aangetroffen namelijk in respectievelijk 29% en 66% van de monsters. De "stilbenen" diethylstilbestrol, dienestrol en hexestrol zijn in 1984 nauwelijks meer gevonden. De identificatie-methode via HPLC met diode array is in 15 maanden vergelijkend onderzoek met GCMS zo specifiek gebleken dat deze de GCMS als bevestigingsmethode mogelijk zou kunnen vervangen voor identificatie van anabolica in toedieningsplaatsen.<br>
    • Separation and purification of several anabolics present in bovine urine by isocratic high performance liquid chromatography

      Jansen EHJM; Both-Miedema R; van Blitterswijk H; Stephany RW (Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu RIVM, 1984-06-15)
      Een eenvoudig isocratisch hoge druk vloeistofchromatografisch systeem wordt beschreven voor de scheiding en zuivering van verschillende typen laag moleculaire anabole verbindingen en enige van hun metabolieten. Voor dit doel worden de verbindingen gechromatografeerd over een "reversed phase" C18 kolom door middel van water-methanol mengsels. Diethylstilbestrol (DES), hexestrol, alfa-R en beta-dienestrol, Zeranol R, zearalenon, zearalanon, 17-beta-Trenbolone R, 19-nortestosteron, 17-alfa-methyltestosteron en medroxyprogesteron worden van elkaar gescheiden. Behalve voor UV-detectie direct gekoppeld aan de vloeistofchromatograaf bleken de geisoleerde fracties ook geschikt voor separaat vervolgonderzoek met (radio)immunochemische detectie, dunnelaagchromatografie, en/of gaschromatografie-massaspectrometrie.