Een vernieuwde detectiemethode voor de bepaling van het runderserum albuminegehalte in biologische producten (vaccins)
Citations
Altmetric:
Series / Report no.
Open Access
Type
Report
Language
nl
Date
1995-07-31
Research Projects
Organizational Units
Journal Issue
Title
Een vernieuwde detectiemethode voor de bepaling van
het runderserum albuminegehalte in biologische producten
(vaccins)
Translated Title
An improved detection method for the determination
of residual animal serum albumin in biologicals
(vaccins)
Published in
Abstract
Een van de controle-testen op bepaalde vaccins is de
bepaling van residueel albuminegehalte m.b.v. Counter Current Electroforese
(C.C.E.).C.C.E. is een techniek die gebaseerd is op electroforese,
gecombineerd met immuno-precipitatie. Bij behandeling van de, in de test
gebruikte, agarose-gelplaten met coomassie briljant blauwoplossing, worden
de gevormde precipitaten donkerblauw gekleurd. Voor het aflezen van de
agarose-gelplaat wordt, in de standaard testmethode, gebruik gemaakt van een
detectiekast voorzien van een melkglasplaat waarin een verlichtingsbron
(gloeilamp) is aangebracht. Gebleken is dat de precipitaten op een
agarose-gelplaat van kleur veranderen, indien zij onder een bepaalde hoek
worden beschenen met behulp van halogeenlicht. Hierbij wordt de
detectie-grens met tenminste een factor 2 verlaagd. De detectie-grens van
de referentie lag op basis van de oude afleesmethode op 1 mul albumine per
liter runderserum. Daarnaast worden artefacten ten gevolge van aspecifieke
achtergrondkleuring vermeden, waardoor de specificiteit van de detectie
verbeterd is.
One of the tests performed at the Department of Biologicals of the Laboratory for Medicins and Medical Devices is an assay for the detection of residual animal serum albumin (bovine serum albumin and ovalbumin) in vaccines. The method used is an immunoprecipitation test using Counter Current Electroforesis (C.C.E.). After electroforesis the precipitate of albumin and anti-albumin serum is stained by Coomassie Brilliant Blue. Traditionally the agarose-gels are visually inspected for the presence of stained precipitates using the light of a bulb shining through opal glass. This report describes the validation of a new detection technique. The agarose-gel is illuminated using two halogen lamps. Under this illumination the precipitates appear as little red lines.Using the traditional detection-method (light bulb) the detection-limit was 1 mul animal serum per litre vaccine. Using the new detection-method (halogen-lamps) the detection-limit is lowered by at least a factor 2. Furthermore, as a consequence of the elimination of background staining artefacts the specificity of the detection is improved.
One of the tests performed at the Department of Biologicals of the Laboratory for Medicins and Medical Devices is an assay for the detection of residual animal serum albumin (bovine serum albumin and ovalbumin) in vaccines. The method used is an immunoprecipitation test using Counter Current Electroforesis (C.C.E.). After electroforesis the precipitate of albumin and anti-albumin serum is stained by Coomassie Brilliant Blue. Traditionally the agarose-gels are visually inspected for the presence of stained precipitates using the light of a bulb shining through opal glass. This report describes the validation of a new detection technique. The agarose-gel is illuminated using two halogen lamps. Under this illumination the precipitates appear as little red lines.Using the traditional detection-method (light bulb) the detection-limit was 1 mul animal serum per litre vaccine. Using the new detection-method (halogen-lamps) the detection-limit is lowered by at least a factor 2. Furthermore, as a consequence of the elimination of background staining artefacts the specificity of the detection is improved.
Description
Publisher
Sponsors
IGZ