Ontwikkeling van een methode om de activiteit van partieel gezuiverd glutamaat decarboxylase in hersenweefsel te bepalen
Citations
Altmetric:
Series / Report no.
Open Access
Type
Report
Language
nl
Date
1986-06-30
Research Projects
Organizational Units
Journal Issue
Title
Ontwikkeling van een methode om de activiteit van partieel gezuiverd glutamaat decarboxylase in hersenweefsel te bepalen
Translated Title
Development of an assay for partially purified glutamate decarboxylase in rat brain tissue
Published in
Abstract
Het doel van deze studie was het ontwikkelen van een methode om de activiteit van glutamaat decarboxylase in hersenweefsel te meten met een eindpuntsbepaling. Het enzym werd partieel gezuiverd en de activiteit gemeten door kwantitatieve bepaling van het produkt na incubatie met het substraat en de cofactor. Na scheiding van het substraat met kationen-wisselaars chromatografie werd het produkt fluorometrisch gemeten in een continuous-flow systeem. De gemeten activiteit bedroeg 3460 + 370 ng GABA/mg eiwit/uur (s.d., n=12). Door berschil in meetmethoden kon geen goede vergelijking met literatuurwaarden worden gemaakt. Er werd een Km bepaling van het substraat uitgevoerd en deze werd vastgesteld op 4,3 mM glutamaat. De waarde lag in de orde van grootte zoals die in de literatuur gevonden wordt. Tevens werd een Km bepaling van de cofactor PLP uitgevoerd en hiervoor werd een waarde van 1,5 um gevonden. Pre-incubatie blijkt echter noodzakelijk.<br>
Description
Publisher
Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu RIVM
Sponsors
RIVM